Sistema Cromatográfico (UHPLC) con separación adicional por Movilidad Iónica (IM) y detección por espectrometría de masas QTOF. Modelo timsTOF (BRUKER)

CARTEL FEDER Sistema Cromatográfico (UHPLC) con separación adicional por Movilidad Iónica (IM) y detección por espectrometría de masas QTOF

Equipo adquirido mediante el programa INFRARED de la Junta de Castilla y León, financiado al 100% con fondos FEDER de la CEE a través de la “Convocatoria de subvenciones para la adquisición de equipamiento científico compartido en el marco de la red de equipamiento científico-tecnológico compartido en Castilla y León denominada «Infraestructuras en red de Castilla y León (INFRARED)» cofinanciadas por el Fondo Europeo de Desarrollo Regional (FEDER) para 2017.

El equipo, cuyo coste asciende a 420.000 € + IVA, ha sido concedido al grupo investigador liderado por la Dra. Gracia Merino (Directora de la Unidad Investigadora Consolidada UIC065). La petición ha sido respaldada por diferentes Grupos de Investigación Reconocidos (GIR) y Unidades de Investigación Consolidadas (UIC) de la Universidad de León (UIC203 del Dr. Secundino López, UIC207 de la Dra. Pilar de Frutos), de la Universidad de Valladolid (UIC219 de la Dra.Teresa Manso), de la Universidad de Salamanca (GIR Polifenoles del Dr. Julián C. Rivas) y de la Universidad de Burgos (GIR SINTORG del Dr.Roberto Sanz).

Los objetivos específicos propuestos tras la adquisición de este equipo timsTOF son los siguientes:

  • Identificación y cuantificación de analitos de interés para la eficiencia de utilización de los alimentos en rumiantes y la producción sostenible de alimentos seguros, saludables y de calidad
  • Calidad de la leche vinculada a la presencia de residuos, orientado al estudio del transportador ABCG2 y sus polimorfismos en la excreción de agentes antiparasitarios y pesticidas en leche de rumiantes.
  • Comparación del perfil metabólico del plasma de animales sometidos a diferentes estrategias de alimentación en la fase de lactancia; relación entre este perfil y diferentes parámetros indicativos de la respuesta inmune y, eficiencia en etapas de producción posteriores.
  • Análisis de polifenoles, derivados metabólicos en alimentos y matrices alimentarias para determinar la calidad de los mismos, planteando la utilidad de estos compuestos como antimicrobianos.
  • Análisis metabolómico y lipidómico de muestras de leche, contenido digestivo ruminal, plasma y orina, recogidas de ovejas y cabras lecheras sometidas a diferentes estrategias de alimentación para modular el perfil de ácidos grasos de la leche, con especial atención hacia el síndrome de depresión de la grasa láctea.
  • Análisis e identificación de productos procedentes de residuos agrícolas que puedan ser eficaces para el desarrollo de bacterias ácido lácticas capaces de degradar el gluten.
  • Caracterización, mejora y mantenimiento de 3 cultivos agrícolas estratégicos para Castilla y León: el maíz, el lúpulo y la alubia del Riñón -IGP “Alubia de la Bañeza-León”.

Acto de Presentación de INFRARED y del Sistema Cromatográfico (UHPLC) con separación adicional por Movilidad Iónica (IM) y detección por espectrometría de masas QTOF. Modelo timsTOF (BRUKER)

El equipo fue presentado a la Comunidad Universitaria el 16 de Junio de 2021 en el Paraninfo de la Facultad de Veterinaria en un acto en el que también se presentó el Portal de INFRARED (Infraestructuras en Red de Castilla y León).

El equipo está instalado en el Laboratorio puerta 107 del Laboratorio de Técnicas Instrumentales, estando su uso abierto a los investigadores interesados y podrá también dar servicio a aquellas instituciones y empresas que así lo requieran.

Para su utilización será necesario rellenar una Solicitud de autorización de uso del Equipo así como cumplimentar en cada utilización el Formulario de uso de equipo timsTOF.

Características:

Sistema Cromatográfico (UHPLC) con separación adicional por Movilidad Iónica (IM) y detección por espectrometría de masas QTOF. Modelo timsTOF (BRUKER)

UHPLC (BRUKER ELUTE)

  • Doble canal con doble pistón. Trabaja con 4 disolventes seleccionando dos a la vez. Presión de hasta 1300 bares (18855 psi).
  • Rango de flujo de 0,001 a 4 mL/min.
  • Inyector automático termostatizado con capacidad para 108 viales de 2 mL o 2 placas de 96 pocillos.
  • Horno de columnas de convección por aire con capacidad de 6 columnas de diferentes tamaños.

Espectrómetro de masa Cuadrupolo-Tiempo de Vuelo con Movilidad Iónica (IM)

  • Fuente de Ionización ESI. Posibilidad de montar otras fuentes (APCI, nano-ESI, etc)
  • Rango de masas del sistema 20-40000 m/z
  • Rango de masas del cuadrupolo hasta 40000 m/z con aislamiento de precursores hasta 3000 m/z
  • TOF con reflectrón de doble etapa y capacidad para detectar iones positivos y negativos.
  • Resolución de masa >60000 (FWHM) en el ion 1222 m/z
  • Exactitud de masas <800 ppb
  • Estabilidad de masas de +/- 0,5 – 1 mDa
  • Sensibilidad en MS Full Scan: 1 pg de reserpina (ión 609 m/z) proporciona una relación S/N de 1000:1 a máxima resolución del equipo
  • Resolución del sistema de Movilidad Iónica (IM) hasta 200
  • Capacidad de medida de CCS (Collisional Cross Section)
  • Velocidad de adquisición hasta 50 Hz tanto en MS como en MS/MS
  • Rango lineal del detector ADC de 10 bits de 105

Dos estaciones de trabajo para adquisición y tratamiento de datos

Ambas estaciones de trabajo tienen IPs fijas y los investigadores podrán conectarse con ellas en remoto. Se disponen de 3 licencias para el software “TASQ” y otras 3 para el software “Metaboscape” lo que permite un máximo de 3 conexiones simultáneas para cada software.

Estación de trabajo de adquisición de datos

  • Software “Hystar” para el control del sistema cromatográfico
  • Software “QTOF Control”: Control completo de todos los parámetros del espectrómetro de masas y del sistema de movilidad iónica. Permite visualizar en tiempo real los espectros de masas, el cromatograma, el movilograma y el mapa de calor que relaciona parámetros de movilidad, masa e intensidad.
  • Software “Data Analysis”: Módulo básico para el postproceso, análisis e interpretación de datos. Incluye la función “Dissect” que permite la detección automática de compuestos en mezclas complejas.

Estación de trabajo de adquisición de datos

  • Software “TASQ”: Software Cliente/Servidor para aplicaciones dirigidas a la determinación de muchos compuestos, donde se necesita el crinado, identificación, confirmación y cuantificación en un único análisis.
  • Software “Metaboscape”: Software Cliente/Servidor para el análisis estadístico de resultados, comparación de muestras e investigación metabolómica “no dirigida”. Contiene un algoritmo “T-Rex” que extrae toda la información relevante de MS y el perfil cromatográfico, incluyendo la función de calibración óptima para cada tramo, relacionando iones procedentes de los mismos compuestos.

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